Das stimmt, bis auf wenige Ausnahmen (z. Phäophytin b, und Chlorophyll a auf den Aluminiumoxid-Platten), mit unserem Versuch überein. Es fällt auch auf, dass beim Übergang (70:30) auf (60:40) die Werte aller Analyten konstant bleiben, oder sogar abnehmen. Weiterhin kann man sagen, dass die Erwartungen bezüglich der Abhängigkeit der Rf-Werte von der Polarität der Analyten weitgehend erfüllt wurden. Dünnschichtchromatographie blattfarbstoffe rf wert in greensboro nc. Adsorptionsaktivität: Bei diesem Versuch müssten, der Theorie nach, die Rf-Werte mit zunehmender Aktivität (sinkendem Wassergehalt) abnehmen, da die Wassermoleküle dann weniger Adsorptionsplätze belegen würden. Das trifft bei unserem Versuch leider nur auf die Übergänge von geringer auf mittlere Aktivität zu. Beim Übergang zur hohen Aktivität stellt man meist einen Anstieg der Rf-Werte fest. Das Carotin entzieht sich ganz der Regel, da dessen Rf-Werte weitläufig konstant bleiben. Bestimmung von Carotin: Stammlösung: 713 μg/ml Kalibrierlösungen: 25, 50, 100 und 200 μl in 10ml Wellenlänge: 453 nm Diagramm: Regressionsgerade: Analyse: → 240, 3 μg in 200 μl Extrakt Fehlerrechnung: Pipetten+Kolben: 1, 5% Photometer: 0, 5% Ergebnis: (14, 01±0, 22) mg/g 4.
Da das Paprikapulver besonders viele verschiedene Farbstoffe aufweist, ist es ein gutes Anschauungsbeispiel fr die Trennung der Farben. Allgemein gibt es nur 3 Pflanzenfarbstoffgruppen: Chlorophyllen, Xantophyllen und Carotinoiden. Die charakteristisch roten Paprikafarbstoffe gehren den Carotinoiden an und werden Capsanthin und Capsorubin genannt und die gelben Vertreter heien Cucurbiten. Dünnschichtchromatographie blattfarbstoffe rf wert video. Der Gesamtcarotinoidgehalt im Paprikapulver liegt bei 0, 1 bis 0, 5%. Versuch 6: Trennung von Testfarbstoffen Man trgt 4 Farbstoffe auf die Startlinie eines DCs und als Vergleich nimmt man das Testfarbstoffgemisch 3. Die 4 Farbstoffe lauten: Buttergelb, Blau, Gelborange und Brilliantschwarz. Anschlieend stellt man das DC in eine mit dafr geeignetem Laufmittel befllten Chromatographiekammer. Die verschiedenen Farbstoffe werden unterschiedlich weit vom Laufmittel getragen und die Farbflecke verteilen sich unterschiedlich vertikal. Man kann gut beobachten dass manche Farbstoffe weiter, manche allerdings nicht so weit getragen werden.
Die luftgetrocknete DC-Platte kann nun unter kurzwelligem (254 nm) und langwelligem (366 nm) UV-Licht betrachtet werden. Auf der DC-Platte befindet sich ein Fluoreszenzindikator, der unter kurzwelligem UV-Licht grün fluoresziert. Durch Fluoreszenzlöschung erscheinen Substanzflecken dunkel. Unter langwelligem UV-Licht besitzen manche Farbstoffe selbst eine Fluoreszenz. Dünnschichtchromatographie blattfarbstoffe rf west side. Auch die Betrachtung unter sichtbarem Licht eignet sich bei farbigen Substanzen. Der Rf-Wert wird nach folgender Formel berechnet: Rf = Laufstrecke Substanz / Abstand Auftragunglinie zur Laufmittelfront UV/VIS-Spektroskopie: Die Probenlösung wird mit einer Pasteurpipette in eine Küvette aus Polystyrol überführt und im UV/VIS-Spektrometer gemessen. Entsorgung Alle Lösungsmittel kommen in den Behälter für organische, halogenfreie Abfälle. Erklärung Dünnschichtchromatographie: Die mobile Phase – das Laufmittel - schleppt alle Farbstoffe mit. Diese haben aber aufgrund ihres unterschiedlichen Aufbaus unterschiedlich starke Wechselwirkungen mit der stationären Phase – dem Kieselgel.
Nur so kann über Kapillarkräfte die mobile Phase nach oben wandern und eine Trennwirkung stattfinden. Man wählt für die mobile Phase oftmals Gemische aus polarer und unpolaren Chemikalien, wie Essigsäureethylester (polar;) und Petrolether (unpolar, Gemisch aus Hexan und Pentan). Durch ein passendes Mischungsverhältnis kann man sich besser auf die zu trennenden Substanzen einstellen. Trennstrecken und Geschwindigkeit der mobilen Phase Die Trennstrecke sollte in der Dünnschichtchromatographie möglichst kurz sein, denn über weitere Trennstrecken beeinflusst Diffusion das Ergebnis der Chromatographie immer mehr. Da auch links und rechts vom auf der Startlinie aufgetragenen Punkt Konzentrationsgradienten herrschen, wird Diffusion auch in diese Richtungen stattfinden. Für eine genauere Erklärung, was Diffusion ist, klicke doch einfach hier. Experiment: Dünnschicht-Chromatographie (DC) der Blattfarbstoffe. Durch die Diffusion ergibt sich über längere Trennstrecken dann kein kleiner, definierter Punkt, sondern eher eine große runde Fläche. Auch sollte die Geschwindigkeit der mobilen Phase nicht zu hoch sein oder niedrig gewählt sein.